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本课程起止时间为:2019-06-20到2019-07-07
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【作业】第一讲 目的基因获得 第一讲作业

1、 问题:PCR未扩增出条带,可能的原因是什么?
评分规则: 【 得分点都对的得满分,少一个得分点酌情扣分

第五讲 蛋白的提取及亲和层析纯化 第五讲测验

1、 问题:含有6xHis 融合标签的重组蛋白可以用下列哪种介质纯化
选项:
A: GST beads
B: NTA-Ni2+ beads
C: M2 beads
D: Protein A beads
答案: 【 NTA-Ni2+ beads

2、 问题:以下哪种亲和配基与固相支持物之间为非共价结合?
选项:
A:GST beads
B:NTA-Ni2+ beads
C: M2 beads
D:Protein A beads
答案: 【NTA-Ni2+ beads

3、 问题:以下哪种纯化技术最可能一步得到比较纯的蛋白
选项:
A: 离子交换层析
B:分子筛层析
C:硫铵分级沉淀
D:亲和层析
答案: 【亲和层析

4、 问题:下列哪个步骤不属于亲和层析步骤
选项:
A:上样
B: 淋洗
C: 洗脱
D:电泳检测
答案: 【电泳检测

5、 问题:下列哪种酶常用于去除融合蛋白的亲和标签
选项:
A: 限制性内切酶
B: 凝血酶 (Thrombin)
C:胰蛋白酶
D: 蛋白酶 K
答案: 【 蛋白酶 K

6、 问题:Ni2+金属螯合层析用的是以下哪两种物质直接的特异结合
选项:
A: Ni 和Imidazole
B: Ni和组氨酸融合标签
C:Beads 和组氨酸标签
D:Ni和蛋白质
答案: 【 Ni和组氨酸融合标签

7、 问题:以下那种情况不适合用Ni2+金属螯合层析纯化
选项:
A: 裂解液里酸性蛋白比较多
B: 裂解液里中性蛋白
C: 裂解液里碱性蛋白
D: 裂解液里富含组氨酸的蛋白比较多
答案: 【 裂解液里富含组氨酸的蛋白比较多

8、 问题:下列哪种亲和标签对蛋白质的分子量改变最大
选项:
A: 6XHis
B: 3XFlag
C: GST
D: 3XMyc
答案: 【 GST

9、 问题:以下哪种物质最为Ni2+金属螯合层析buffer里要避免含有的?
选项:
A:NaCL
B:B、 尿素
C: EGTA
D: Tris
答案: 【B、 尿素

10、 问题:下列哪种化学物质最不可能出现在亲和层析洗脱buffer中
选项:
A:SDS
B:NaCl
C:Imidazole
D:GSH
答案: 【SDS

第二讲 T-A重组和转化 第二讲测验

1、 问题:下列那个指标能证明在大肠杆菌中成功表达了外源酶蛋白质 [      ]
选项:
A:Western杂交证明表达的外源蛋白质分子量正确
B:在蓝白筛选中菌落呈现蓝色
C:RT-PCR能扩增外源基因
D:纯化目的蛋白质具有酶活性
答案: 【纯化目的蛋白质具有酶活性

2、 问题:为了防止载体自身环化,可以用下列那种基因工程酶[        ]
选项:
A:单一限制性内切酶  
B:DNA聚合酶
C:碱性磷酸酶  
D:核苷酸激酶
答案: 【碱性磷酸酶  

3、 问题:下列方法中不能直接获得目的基因的是 [        ]
选项:
A:人工化学合成 
B:PCR体外扩增 
C:从蛋白质序列反推编码序列
D:筛选基因文库
答案: 【从蛋白质序列反推编码序列

4、 问题:根据当前技术进展,为了获得转基因小鼠,所采用的受体细胞最有可能为[            ]
选项:
A:皮肤细胞
B:卵细胞 
C:受精卵细胞
D:造血干细胞
答案: 【受精卵细胞

5、 问题:某位同学采用经典克隆技术,将目的基因在大肠杆菌中克隆。他所采用的工程酶,按照先后顺序,排列正确的是 [          ]。
选项:
A:DNA连接酶–Taq DNA聚合酶—限制性内切酶
B:限制性内切酶–Taq DNA聚合酶—DNA连接酶
C:Taq DNA聚合酶–限制性内切酶—DNA连接酶
D:Taq DNA聚合酶–DNA连接酶–限制性内切酶
答案: 【Taq DNA聚合酶–限制性内切酶—DNA连接酶

6、 问题:蓝白筛选主要用在下列哪种实验目的[          ] 
选项:
A:区分转化子和非转化子 
B:区分重组子和非重组子
C:直接筛选目的基因 
D:鉴定转化效率 
答案: 【区分重组子和非重组子

7、 问题:以下基因工程载体的克隆容量最大的是[         ]
选项:
A:细菌质粒载体 
B:λ噬菌体载体
C:酵母人工染色体载体
D:柯斯质粒载体
答案: 【酵母人工染色体载体

8、 问题: 不能直接用作PCR模板的为[          ]
选项:
A:基因组DNA  
B:RNA
C:质粒  
D:cDNA
答案: 【RNA

9、 问题:下列报告基因能用来进行蛋白质亚细胞定位的是[       ]
选项:
A:GUS
B:GFP
C:LUC
D:LacZ
答案: 【GFP

第三讲 质粒提取、酶切鉴定 第三讲测验

1、 问题:一般质粒DNA为
选项:
A:单链线状 
B:单链环状
C:双链线状
D:双链环状
答案: 【双链环状

2、 问题:质粒DNA的构型主要为
选项:
A:线型  
B:螺旋状
C:超螺旋结构
D:以上结构均包括
答案: 【以上结构均包括

3、 问题: 碱裂解法提取质粒时,溶液II中SDS的作用是:
选项:
A:使蛋白质变性  
B:抑制核酸酶活性

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