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本课程起止时间为:2022-02-21到2022-06-30
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【作业】临床标本处理与分离纯化技术 临床标本处理与分离纯化技术

1、 问题:简述核酸分离纯化的主要步骤。
评分规则: 【 目前核酸的分离纯化主要包括4个步骤:①制备细胞及破碎细胞。②消化蛋白质,去除与核酸结合的蛋白质、多糖及脂类等生物大分子。③去除其它不需要的核酸分子。④沉淀核酸,去除盐类、有机溶剂等杂质。

2、 问题:简述碱裂解法提取质粒DNA的原理。
评分规则: 【 碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。

3、 问题:简述蛋白质分离纯化的方法及其原理。
评分规则: 【 (1)根据蛋白分子大小不同:主要有透析、超滤、凝胶过滤和离心等。(2)根据蛋白分子溶解度不同:常用的方法有等电点沉淀和pH值调节、蛋白质的盐溶和盐析、有机溶剂法等。(3)根据蛋白表面电荷不同:常用方法有电泳和离子交换层析。(4)采用配体的特异性亲和力:亲和层析等。

【作业】临床分子生物学检验标志物 临床分子生物学检验标志物

1、 问题:简述DNA生物标志物的类型。
评分规则: 【 DNA生物标志物包括:(1)基因突变 (2)基因多态性 (3)循环DNA (4)DNA单倍型(5)DNA表观修饰 (6)病毒基因(7)DNA含量变化等。一个两分

2、 问题:人类基因组中有哪些基因多态性分子标志物?并列举相应的检测方法。
评分规则: 【 人类基因组中的基因多态性包括限制性片段长度多态性、小卫星和卫星多态性、单核苷酸多态性和拷贝数多态性。
限制性片段长度多态性可以通过酶切进行鉴定;小卫星和微卫星多态性可以通过PCR结合凝胶电泳;单核苷酸多态性可以通过酶切、荧光定量PCR、DHPLC、测序和基因芯片等;拷贝数变异可以通过荧光原位杂交和基因芯片进行检测。

3、 问题:简述分子生物标志物的基本特征和评价阶段。
评分规则: 【 (1)分子生物标志物的特征:在临床上是否有可行的检测方法;可以增加新的信息;有助于医生对患者的处理。
(2)分子生物标志物的评估阶段:第一阶段为临床前的探索性研究;第二阶段为建立可以在临床应用的检测方法,具有良好的重复性,测定仪器便携;灵敏度和特异性等临床效能应该达到特定临床应用的最低阈值要求;第三阶段,针对临床上还未能进行检测的疾病进行试验,对生物标志物的灵敏度和特异性进行评价;第四阶段,要在前瞻性队列研究中评估分子生物标志物的灵敏度和特异性;第五阶段主要是在筛选的人群中对新的诊断方法进行效益/风险评估。

临床分子生物学检验标志物 分子标志物

1、 问题:下列叙述哪项是错误的
选项:
A:原核生物基因组具有操纵子结构
B:原核生物结构基因是断裂基因
C:原核生物基因组中含有插入序列
D:原核生物基因组中含有重复顺序
E:原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNA
答案: 【原核生物结构基因是断裂基因

2、 问题:病毒的遗传物质是
选项:
A:DNA
B:RNA和蛋白质
C:DNA或RNA
D:RNA和DNA
E:DNA和蛋白质
答案: 【DNA或RNA

3、 问题:人类可遗传的变异中最简单、最常见的一种是
选项:
A: RFLP
B:VNTR
C:STR
D:SNP
E:CNV
答案: 【SNP

4、 问题:母亲血浆中的胎儿DNA
选项:
A:占母亲血浆总DNA的50%以上
B:可用于检测胎儿从母亲遗传而来的线粒体DNA突变
C:确定RhD阳性孕妇所怀的胎儿的RhD情况
D:确定胎儿是否从母亲遗传了X连锁的基因突变
E:血友病A的产前诊断
答案: 【确定RhD阳性孕妇所怀的胎儿的RhD情况

5、 问题:DNA生物标志物的类型包括
选项:
A:基因突变
B:基因多态性
C:循环DNA
D:病毒基因
E:DNA表观修饰
答案: 【基因突变;
基因多态性;
循环DNA;
病毒基因;
DNA表观修饰

6、 问题:人类基因组中有哪些基因多态性分子标志物?
选项:
A:限制性片段长度多态性
B:小卫星多态性
C:卫星多态性
D:单核苷酸多态性
E:拷贝数多态性
答案: 【限制性片段长度多态性;
小卫星多态性;
卫星多态性;
单核苷酸多态性;
拷贝数多态性

7、 问题:分子生物标志物评价阶段有
选项:
A:临床前的探索性研究
B:建立可以在临床应用的检测方法,具有良好的重复性,测定仪器便携;灵敏度和特异性等临床效能应该达到特定临床应用的最低阈值要求
C:针对临床上还未能进行检测的疾病进行试验,对生物标志物的灵敏度和特异性进行评价
D:要在前瞻性队列研究中评估分子生物标志物的灵敏度和特异性
E:在筛选的人群中对新的诊断方法进行效益/风险评估
答案: 【临床前的探索性研究;
建立可以在临床应用的检测方法,具有良好的重复性,测定仪器便携;灵敏度和特异性等临床效能应该达到特定临床应用的最低阈值要求;
针对临床上还未能进行检测的疾病进行试验,对生物标志物的灵敏度和特异性进行评价;
要在前瞻性队列研究中评估分子生物标志物的灵敏度和特异性;
在筛选的人群中对新的诊断方法进行效益/风险评估

8、 问题:循环游离核酸检测意义
选项:
A:循环DNA和RNA水平的检测在产前诊断、恶性肿瘤早期诊断和病程监测等方面具有十分重要的意义
B:血浆中存在稳定的microRNA,也可以作为潜在的分子标志物
C:游离循环DNA可以对肿瘤治疗和病程进行监测,是潜在的肿瘤早期诊断和预后判断的分子标志物
D:孕妇外周血中的游离DNA是开展无创性产前诊断较佳的分子标志物,可用于胎儿性别鉴定、非整倍体检测和单基因遗传病的检测
E: microRNA与肿瘤的发生、发展有着极为密切的关系,microRNA在肿瘤中表达失调,且具有组织特异性,而在血液中有异常高的稳定性
答案: 【循环DNA和RNA水平的检测在产前诊断、恶性肿瘤早期诊断和病程监测等方面具有十分重要的意义;
血浆中存在稳定的microRNA,也可以作为潜在的分子标志物;
游离循环DNA可以对肿瘤治疗和病程进行监测,是潜在的肿瘤早期诊断和预后判断的分子标志物;
孕妇外周血中的游离DNA是开展无创性产前诊断较佳的分子标志物,可用于胎儿性别鉴定、非整倍体检测和单基因遗传病的检测;
 microRNA与肿瘤的发生、发展有着极为密切的关系,microRNA在肿瘤中表达失调,且具有组织特异性,而在血液中有异常高的稳定性

9、 问题:基因多态性分析是基因组研究的重要手段,数年前完成的举世瞩目的人类基因组计划即是用分析遗传标志的多态性作为研究的主要手段。
选项:
A:正确

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